女同 porn 脑声问答（109）期丨不同品系小鼠在大脑中动脉栓塞模子中相反|血管|腹腔|脑缺血|小家鼠|mcao
发布日期：2024-11-07 08:09 点击次数：98
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艳母快播将C57BL/6和ICR小鼠分为4组，辞别为C57BL/6简单组、C57BL/6模子组、ICR简单组、ICR模子组。本着减少动物伤害的原则，设C57BL/6简单组和ICR简单组为5只，C57BL/6模子组和ICR模子组辞别设10只。
局灶性脑缺血再把稳损害模子（栓线法）
C57BL/6和ICR模子组小鼠进行大脑中动脉栓塞（MCAO）造模。0.5%戊巴比妥钠麻醉，颈部备毛、消毒，作念正中切口，分离右侧颈总动脉（common carotid artery，CCA）、颈外动脉（external carotid artery，ECA）、颈内动脉（internal carotid artery，ICA），微动脉夹夹闭ICA，近心端结扎CCA、ECA、距CCA分叉部2mm处剪口，将栓线插入到ICA，在CCA远心端轻系栓线。用眼科镊将线栓向脑部送入，线栓的线直径0.16mm，头部直径0.20±0.01mm，插入深度为9mm（血管分叉处至线栓前端的距离）。待细目好插入深度后，系牢CCA远心端的结扎线，线栓插入的时刻即为脑缺血的时刻。在脑缺血90min时，用镊子逐渐拔出线栓约1cm后剪断线栓，剩余少部分线拴留在CCA中，以认真血管出血。同期血液可由willis环再次干与大脑中动脉，齐全脑部血管再把稳。之后缝合动物伤口，回笼饲养，简单供应水和饲料，不雅察动物状态。小鼠脑内线栓走向如图1所示。
C57BL/6和ICR简单组小鼠仅进行颈部血管分离操作，缝合伤口后，回笼饲养，简单供应水和饲料，不雅察动物状态。
复合Garcia神经评分
C57BL/6和ICR模子组小鼠辞别于缺血后6h和24h进行复合Garcia神经步履学评分，满分为21分，最低分为3分，评分全程在一块20cm×30cm的随意平板上进行。
体重变化率测定：
在小鼠术前和术后的24h，辞别用电子天平称得其体重，贪图其体重变化率。体重变化率的贪图规范为：体重变化率（%）=（术前体重-术后体重）/术前体重×100%
脑指数测定：
在小鼠MCAO术后24h，招揽0.5%戊巴比妥腹腔打针麻醉，赶紧断头正法取前脑，用滤纸注重性吸掉小鼠前脑名义的脑脊液和血液，用电子天平称量得回整脑湿重（精准到0.001g），脑指数的贪图规范为：脑指数（%）=整脑湿重/小鼠体重×100%
脑含水量测定：
在小鼠MCAO术后24h，招揽0.5%戊巴比妥腹腔打针麻醉，赶紧断头正法取前脑，取右半侧缺血侧大脑，轻轻用滤纸吸去名义的血液和脑脊液，置于已称重的培养皿中，用电子天平称湿重（精准到0.001g），然后放入60℃的烘箱中烘烤72h至恒重，称其干重，贪图脑组织含水量。脑含水量的贪图规范为：脑含水量（%）=（湿重-干重）/湿重×100%。
脑梗死面积测定：
在小鼠MCAO术后24h，招揽0.5%戊巴比妥腹腔打针麻醉，赶紧断头正法，取脑后实时沿冠状纵切成4片，脑片速即用0.2%TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）在37℃恒温下进行染色约20min，拍摄脑片梗死灶散布情况相片，并用image pro plus软件画出每个脑片的缺血面积和全脑单方面积，贪图脑梗死面积。脑梗死面积的贪图规范为：脑梗死面积（%）=梗死面积/全脑单方面积×100%。
不雅察动物生涯率：
边界到缺血后的24h，不雅察C57BL/6和ICR模子组小鼠的生涯率。生涯率的贪图规范为：生涯率=存活只数/原始只数×100%。
脑部血管铸型
选拔ICR小鼠进行脑部血管铸型。用生理盐水进行把稳，直至冲洗出的血水色调变浅，肝脏变白，后用自凝牙托水（3.75mL）、自凝牙托粉（2g）、邻二甲基苯丙醛（1.5mL）、红色热枕（0.2g）混匀后从心尖注入小鼠体内。静置24h后，剪掉过剩的外相和组织，泡入4mol·L-1的氢氧化钾溶液中约一周，即得回ICR小鼠脑血管铸型。
Table1复合Garcia神经步履学评分表
在基础策动中，进行推行之前选拔动物的种类是热切的一步，但经常是容易被忽略的所在。此前有策动发现，在MCAO模子制备经由中，动物体重、麻醉姿首、线栓插入深度、线栓头段直径等成分对大小鼠造模得手与否均具有额外关节的作用。但推算作物的品系选拔经常会对推行数据产生一定的影响，因为不同品系之间的相反是如实存在的。有策动发现ICR、C57BL/6J在学习方面存在相反三个品系中，C57BL/6J小鼠自觉举止低，旷场推行心焦水平高，空间参考回想优于ICR小鼠；发现C57BL/6小鼠与ICR小鼠在急性济急抑郁模子中的发达存一定相反，在小鼠自觉举止量和对新奇环境的探索技艺上，C57BL/6小鼠不如ICR小鼠，况兼C57BL/6小鼠在急性应激刺激下更易产生步履悔悟；在策动痴肥模子时发现C57BL/6J模子组小鼠可酿成讲究痴肥模子，ICR模子组小鼠与痴肥模子关联的认识，如体重、脂肪分量、Lee’s指数、脂肪细胞横截面面积等，均不如C57BL/6J小鼠变化彰着；发现不同品系小鼠在禁食和（或）禁水景色下血糖变化趋势有所不同，发达为ICR小鼠的血糖浓度低于C57BL/6J小鼠，但ICR小鼠的血糖变化幅度较C57BL/6J小鼠更大。在各项推行策动中，需同期研讨不同品系动物之间的相反，从而选拔顺应的动物进行策动并对数据进行合理分析和阐明。
文件援用：
1.急性缺血性脑卒中的临床调养策动进展[J]. 申青仙;张赛;涂悦;王振国;刘洋.中国医药，2020(04)
2.郑晓宇，宋文婷，李磊，等.C57BL/6和ICR品系小鼠在大脑中动脉栓塞（MCAO）模子中相反的策动[J].宇宙科学时期-中医药当代化，2022，24(05):1925-1932.
3.The possible roles of necroptosis during cerebral ischemia and ischemia / reperfusion injury[J]. Liao Suchan;Apaijai Nattayaporn;Chattipakorn Nipon;Chattipakorn Siriporn C..Archives of Biochemistry and Biophysics，2020
4.Effects and mechanisms of compound Chinese medicine and major ingredients on microcirculatory dysfunction and organ injury induced by ischemia/reperfusion[J]. Han JingYan;Li Quan;Ma ZhiZhong;Fan JingYu.Pharmacology & therapeutics，2017
5.Blood-brain barrier breakdown in acute and chronic cerebrovascular disease.[J]. Yang Yi;;Rosenberg Gary A.Stroke，2011
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